DMEM(Dulbecco改良Eagle培養(yǎng)基)是一種廣泛使用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,可用于支持很多種類的哺乳動物細(xì)胞生長。已經(jīng)在DMEM中培養(yǎng)成功的細(xì)胞包括原代成纖維細(xì)胞、神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞、HUVEC、平滑肌細(xì)胞,以及HeLa、293、Cos-7和PC-12等細(xì)胞系。針對廣泛的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用,提供了多種組分的DMEM改良培養(yǎng)基。使用培養(yǎng)基選擇工具查找適合的配方。
低糖培養(yǎng)基的適用場景:
細(xì)胞類型:原代腫瘤細(xì)胞、貼壁依賴性強(qiáng)的上皮細(xì)胞、單克隆抗體融合實(shí)驗(yàn)。
研究領(lǐng)域:糖代謝機(jī)制、糖尿病模型構(gòu)建、疫苗生產(chǎn)。
判斷細(xì)胞適應(yīng)低糖環(huán)境的核心指標(biāo):
代謝活性變化:
糖酵解抑制:低糖環(huán)境下,若細(xì)胞通過增強(qiáng)磷酸戊糖途徑或谷氨酰胺代謝維持能量供應(yīng),表明其適應(yīng)能力較強(qiáng)。
乳酸積累減少:低糖培養(yǎng)基中乳酸產(chǎn)量降低40%以上,提示細(xì)胞代謝轉(zhuǎn)向更高效途徑。
增殖與周期調(diào)控:
生長速率:適應(yīng)低糖的細(xì)胞在低糖酸性條件下S期比例恢復(fù),接近正常培養(yǎng)水平。
周期阻滯緩解:通過流式細(xì)胞術(shù)檢測,若G2期細(xì)胞比例下降且增殖標(biāo)志物表達(dá)穩(wěn)定,說明細(xì)胞已適應(yīng)。
分子標(biāo)志物檢測:
c-Myc通路激活:c-Myc及其下游基因(ASCT2、GLS、PPAT)表達(dá)上調(diào),驅(qū)動谷氨酰胺代謝和核苷酸合成。
凋亡抑制:BAK/BAX蛋白活性降低,細(xì)胞凋亡信號減弱(如癌細(xì)胞通過此機(jī)制逃逸化療殺傷)。